Повреждение лизосом при воспалении

Значение лизосом в патологии столь многогранно и существенно, что в настоящее время трудно представить патологический процесс, в который не был бы вовлечен лизосомальный аппарат клетки. Следует выделить два аспекта этой проблемы. Во-первых, вовлечение лизосом в развитие таких общих патологических процессов, как воспаление и некроз и в этом случае участие лизосом является одним из проявлений их нормальной защитной функции организма в ответ на возникновение очага инфекции. Однако развитие ряда патологий связано с нарушением структуры и функции самих лизосом. Нарушения в лизосомах являются первичным, пусковым звеном в развитии двух типов патологических процессов. Для первого из них характерно повреждение лизосомальных мембран. Каковы же обстоятельства, способствующие возникновению патологической дестабилизации лизосомальной мембраны, ведущей к выходу в клеточный матрикс кислых гидролаз? Установлено, что проницаемость лизосомальных мембран значительно увеличивается при гипоксии (недостаток кислорода), изменении кислотно-щелочного равновесия, после травм и хирургических вмешательств, голодании, при заболеваниях суставов и инфекционных заболеваниях, воздействии ионизирующей радиации и некоторых химических агентов. Последнее нашло практическое применение, в частности направленное повреждающее воздействие некоторых фармакологических агентов и ионизирующей радиации на мембраны лизосом опухолевых клеток используется при лекарственной и радиотерапии онкологических заболеваний. Из патологических состояний, связанных с повреждением лизосомальных мембран и высвобождением гидролаз, наиболее изучены болезни суставов — острый и ревматоидный артриты, подагра. При этих заболеваниях, в результате воздействия лизосомальных ферментов, наблюдается эрозия хрящей и деструкция суставов Показано, что аналогичные изменения могут быть получены у экспериментальных животных при введении в область сустава, веществ, обладающих дестабилизирующим действием на лизосомальные мембраны, например стрептолизина S. Наоборот, вещества, стабилизирующие лизосомальные мембраны (к ним относятся многие противовоспалительные препараты, например, глюкокортикостероид — кортизон), значительно уменьшают воспалительную реакцию.

К другой, сравнительно редкой группе заболеваний обусловленных нарушением функции лизосом, относят врожденные генетические нарушения в системе синтеза лизосомальных ферментов. Эти нарушения приводит к развитию так называемых лизосомальных болезней накопления. Такие болезни вызываются, главным образом, мутацией в гене, кодирующем ту или иную гидролазу, что выражается либо в полном подавлении синтеза ферментного белка, либо в синтезе белковых молекул обладающих резко сниженной биокаталитической активностью. Кроме этого генетически обусловленными могут быть нарушения при которых ферментный белок синтезируется без сигнальных участков и по этой причине не распознается транспортной системой. В результате блокируется его доставка из аппарата Гольджи в лизосомы. Нерасщепленный субстрат такой гидролазы накапливается в лизосомах, что приводит к переполнению клеток разбухшими лизосомами, клетки приобретают пенистый вид (пенистые клетки), утрачивают вследствие этого свои функциональные свойства и в конечном результате погибают, что ведет к развитию тяжелых заболеваний (напр. болезнь Тей-Сакса, Гоше, Нимана-Пика и др.), заканчивающихся во многих случаях смертельным исходом в детском возрасте.

Источник

· активация ферментов лизосом→ распад белков, углеводов, липидов, нуклеиновых кислот клетки → нарушение метаболизма, аутолиз клетки. Поступление ферментов лизосом в окружающую среду вызывает развитие воспаления.

При патологии может наблюдаться снижение активности лизосомальных ферментов наследственного и приобретенного характера.

Наследственная или первичная недостаточность ферментов лизосом обусловлена генетическим дефектом синтеза ферментов. В связи со снижением активности ферментов в клетках происходит накопление веществ, которые в норме метаболизируются с участием энзимов лизосом. Указанные формы лизосомальных ферментопатий называются болезнями накопления или лизосомными болезнями (гликогенозы, гепатозы и др.) Лизосомы, потерявшие способность к выполнению своих специфических функций, начинают заполнять клетку и в конечном итоге вызывают превращение ее в огромную каплю того вещества, которое не смогли расщепить дефектные лизосомы. Чаще всего при лизосомных болезнях поражаются клетки печени, скелетной мускулатуры, центральной нервной системы.

Приобретеннаяиливторичная недостаточность ферментов лизосом связана с воздействием токсинов, солей тяжелых металлов и др. повреждающих факторов на клетку. В патогенезе имеет значение инактивация активных центров лизосомальных ферментов, недостаточность энергетического обеспечения деятельности ферментов, нарушение гормональной регуляции клеточных функций, а также нарушение системы циклических нуклеотидов.

ПОВРЕЖДЕНИЕ РИБОСОМ

Рибосомы – плотные сферические гранулы, состоящие из РНК (40% массы). Рибосомы связаны с эндоплазматической сетью, а также могут свободно находиться в цитоплазме, располагаться поодиночке или группами.

Рибосомы необходимы для реализации генетической программы клеток, с их участием происходит синтез белка на основе считывания информации с и-РНК.

Повреждающие факторы

· разрушение группировок субъединиц рибосом (полисом)
· уменьшение числа рибосом
· отрыв рибосом от мембран эндоплазматического ретикулума

уменьшение синтеза белка в клетке.

ПОВРЕЖДЕНИЕ ЭНДОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ СЕТИ И ПЕРОКСИСОМ

Эндоплазматическая сеть (ретикулум) представлена системой внутриклеточных канальцев, вакуолей, цистерн, ограниченных цитоплазматическими мембранами. Эта система составляет основную часть внутриклеточных органелл, она контактирует с ядерной оболочкой, аппаратом Гольджи, митохондриями, рибосомами и предназначена для транспорта веществ в клетку, депонирования веществ, в частности, катиона кальция, детоксикации различных химических веществ экзогенного и эндогенного происхождения (микросомальная система окисления), синтеза липидов и белков как на экспорт, так и для собственных мембран клетки, синтеза ферментов лизосом.

Структурные проявления повреждения эндоплазматической сети

· расширение канальцев сети, вплоть до образования крупных вакуолей и цистерн, вследствие накопления в них жидкостей

· отек и набухание вакуолей и петель, которые могут распадаться на мелкие гранулы, что может привести к отсоединению рибосом от шероховатого ретикулума

Последствия повреждения эндоплазматической сети

Многообразны, зависят от вида клеток, включают, например, нарушение распространения импульса возбуждения, синтеза белка, сократительной функции мышечных волокон, процессов детоксикации, развитие клеточной дистрофии и др.

Пероксисомы (микротельца) топографически тесно связаны с гладким эндоплазматическим ретикулумум. В них содержатся различные оксидазы, которые участвуют в процессах окисления жирных кислот, углеводов, аминокислот и др. Пероксисомы участвуют в образовании и инактивации перекиси водорода, окислении СЖК, мочевой кислоты. Пероксисомы обеспечивают кислород-зависимый бактерицидный эффект при фагоцитозе. При повреждении пероксисом происходит увеличение или уменьшение их количества в клетке.

Может наблюдаться наследственное нарушение функции пероксисом (дефект ферментов или отсутствие микротелец в клетке).

Последствия повреждения пероксисом: снижение активности ферментов пероксисом, недостаточность фагоцитоза.

ПОВРЕЖДЕНИЕ КОМПЛЕКСА ГОЛЬДЖИ,

МИКРОТРУБОЧЕК И МИКРОФИЛАМЕНТОВ

Аппарат Гольджи (пластинчатый комплекс) образован системой канальцев и цистерн, выполняет значительную роль в процессах транспорта всех внутриклеточных белков, синтеза ряда веществ, активации ферментов. Участвует в депонировании белков и биологически активных веществ, синтезированных в эндоплазматической сети. С помощью пластинчатого комплекса происходит процесс выведения готовых секретов за пределы клетки, поэтому он особенно хорошо развит в секреторных и нервных клетках. Вакуоли аппарата Гольджи дают начало лизосомам.

Последствия повреждения аппарата Гольджи

· нарушение доставки клеточных белков

· нарушение выведения из клетки продуктов жизнедеятельности

· нарушение инактивации токсических соединений

· нарушение активности ферментов лизосом

Микротрубочки и микрофиламенты составляют «скелет» клетки, обеспечивают выполнение ими опорной, транспортной, контрактильной, двигательной функций. Микротрубочки часто уложены в связки, что обеспечивает значительную прочность и жесткость цитоскелету, они образуются при полимеризации белка тубулина. Сократительные белки клетки тубулин, динеин, динамин, актин, миозин прикреплены к органоидам и плазматической мембране, что обеспечивает форму клетки, ее передвижение, внутриклеточное перемещение органоидов и включений соединений. Благодаря этой системе происходит также прикрепление клетки к межклеточному веществу и клеток между собой, передача цитоплазматического сигнала от рецепторов на цитоплазматическую мембрану внутри клетки.

Повреждение цитоскелета клетки вызывают вирусы, токсины бледной поганки, колхицин, антитела против белков цитоскелета.

Последствия повреждения цитоскелета клетки

o Нарушение транспорта секреторных гранул и жидкостей

o Нарушение реализации фагоцитоза

o Нарушение митотического деления клетки

o Нарушение упорядочного движения ресничек

o Плохое прикрепление клеток к межклеточному веществу, что облегчает процесс метастазирования при опухолевом росте

ПОВРЕЖДЕНИЕ ГИАЛОПЛАЗМЫ И ПЛАЗМОЛЕММЫ

Цитоплазма (гиалоплазма) представляет собой жидкую слабовязкую внутреннюю среду клетки, основным компонентом ее является внутриклеточная жидкость, различные структуры (органеллы), специализированные образования, включения. В гиалоплазме наблюдается упорядочная циркуляция внутриклеточной жидкости, а также ритмическое движение органелл. Благодаря свойствам гиалоплазмы в различных регионах клетки может циркулировать различная по составу жидкость.

При действии повреждающих факторов происходит:

· уменьшение или увеличение содержания в гиалоплазме жидкостей

· протеолиз или коагуляция белка цитоплазмы

· образование включений, не встречающихся ранее

· нарушение упорядочного характера циркуляции жидкости (изменения транспорта нейромедиаторов по аксонам нейронов, замедление миграции фагоцитов).

Повреждение гиалоплазмы приводит к нарушению процессов метаболизма в клетке, функции органелл, процессов восприятия регулирующих влияний на клетку.

Плазмолемма в норме выполняет защитную, барьерную, контактную, информационную, транспортную функции, так как благодаря ей происходит межклеточное взаимодействие и кооперация клеток из-за наличия на ней рецепторных образований, поверхностных антигенов, межклеточных стыков.

При повреждении клетки указанные функции нарушаются в следствие:

· значительного повышения проницаемости плазмолеммы

· нарушения целостности плазмолеммы

· снижения числа и чувствительности рецепторных структур и трансмембранных каналов.

Нарушение функции плазмолеммы может потенцировать степень и масштаб расстройств в уже поврежденной клетке, а также вызвать альтерацию других, интактных клеток.

АПОПТОЗ КЛЕТКИ

Развитие многоклеточного организма предполагает наличие баланса между пролиферацией, дифференцировкой и гибелью клеток. Они погибают как в физиологических, так и в патологических ситуациях. Клетки, выполнившие свои функции, погибают в течение всей жизни организма. Известно два качественно различных вида смерти клеток:

1. некроз

2. апоптоз

Отличия некроза и апоптоза

Некроз	Апоптоз
Смерть поврежденной клетки	Программированная гибель клетки
Отмечается необратимое прекращение жизнедеятельности, которому предшествует состояние паранекроза и некробиоза	Программа апоптоза запускается информационным сигналом
Является завершающим этапом клеточных дистрофий	Завершается фагоцитозом фрагментов разрушенной клетки
Является следствием действия на клетку высоко патогенных факторов	Наступает в ходе многих естественных процессов и при адаптации клетки к повреждающим факторам
Морфологически отмечается кариопикноз или кариолизис, набухание, сморщивание, кальциноз в митохондриях	Морфологически отмечается конденсация и фрагментация цитоплазмы, конденсация и рексис ядра
При лизисе клетки происходит освобождение содержимого в межклеточное пространство, что сопровождается развитием воспаления	Не сопровождается развитием воспаления
Лизис некротизированной клетки может происходить под влиянием ферментов лизосом (аутолиз) и фагоцитозом (гетеролизис), без использования энергии	Энергозависимый процесс, требует синтеза белка

Читайте также: Отек ног при воспалении

СТАДИИ И МЕХАНИЗМЫ АПОПТОЗА

1.Инициация

2. Программирование

3. Реализация программы

4. Удаление погибшей клетки

1. Инициация

В эту стадию на рецепторы клетки поступают сигналы, стимулирующие апоптоз. Эти сигналы могут быть:

Внеклеточные:	Внутриклеточные:
Действие на клетку ФНО	Ацидоз
Отсутствие действия на клетку	Избыток свободных радикалов
факторов роста, цитокинов	Повышение температуры
	Внутриклеточные вирусы

2. Программирование

В эту стадию происходит передача сигнала апоптоза для активации исполнительной программы двумя механизмами:

· минуя геном клетки, активируя каспазы и эндонуклеазы — ферменты, вызывающие протеолиз белков (прямая активация каспаз и эндонуклеаз)

· через геном клетки: репрессия генов, кодирующих ингибиторы апоптоза, либо активация генов, кодирующих промоторы апоптоза (опосредованная активация каспаз и эндонуклеаз)

3. Реализация программы

Гибель клетки вследствие активации протеолитического и нуклеолитического каскадов.

Активация Са 2+, Мg 2+ — зависимых эндонуклеаз→
распад ДНК

Активация каспаз →
протеолиз белков цитоскелета, ядра, регуляторных белков, ферментов и др.

Разрушение клетки, образование апоптозных телец
(окруженные мембраной фрагменты клетки, содержащие остатки органелл, цитолеммы, цитоплазмы, хроматина)

4. Удаление фрагментов погибших клеток

Дата добавления: 2015-11-05; просмотров: 987 | Нарушение авторских прав | Изречения для студентов

Читайте также:

Рекомендуемый контект:

Поиск на сайте:

Источник

Роль лизосом и пероксисом в механизмах
повреждения клетки трудно переоценить.
В 1892 году И.И.Мечников прозорливо заметил,
что: «Primummovensвоспалительной реакции есть пищеварительное
действие протоплазмы, проявляемое
относительно вредного деятеля» и,
фактически, предугадал открытие лизосом.
Первооткрыватель этих органоидов
Кристиан де Дюв (1951) назвал лизосомы
«стартовыми площадками воспаления».
Ему же принадлежит образная характеристика
лизосомы как «мешка самоубийства»,
подчеркивающая участие лизосом в
аутолизе.

При повреждении клеток первичные
лизосомы участвуют в процессе аутофагии,
захватывая и переваривая своими
гидролазами в составе аутофагосом
остатки разрушающихся органоидов.
Гетерофагия представляет собой составную
часть фагоцитоза и пиноцитоза и состоит
в образовании из эндосом и первичных
лизосом фагоцитарных вакуолей (фагосом),
где подвергаются разрушению захваченные
при эндоцитозе объекты.

В фагосомах (аутофагосомах) действует
и окислительный механизм разрушения
объектов ауто- и гетерофагии, осуществляемый
при участии активных кислородных
радикалов – супероксидного аниона,
синглетного кислорода, гидроксильного
радикала и перекиси водорода. Одним из
важных источников этих радикалов, наряду
с ГЭР, митохондриями и цитоплазматическими
ферментами, служат оксидазы пероксисом,
также участвующих в процессах, происходящих
в фагосоме и аутофагосоме.

Лизосомальная мембрана весьма стабильна
и не повреждается даже при наличии в
лизосоме агрессивных энзимов, радикалов
и кислой среды (рН в работающей лизосоме
достигает 1,5-2 ед.). При обратимых
повреждениях клетки, даже если они
глубоки, пероксисомы и лизосомы не дают
утечки агрессивного содержимого,
несмотря на то, что в этих условиях может
наблюдаться их значительное набухание.

Отсутствие сколько-нибудь значительных
повреждений лизосом характерно для
осуществления запрограммированной
гибели клеток путем апоптоза. Однако
гипоксия, ацидоз, радиация, голодание,
избыток и недостаток витаминов А, Е и
D, ряд ядов (например,
эндотоксины бактерий тифо-паратифозной
группы) и многие другие факторы увеличивают
проницаемость лизосомальных мембран.

При глубоком необратимом повреждении
некробиотические изменения в клетке
всегда приводят к разрушению лизосом,
что вызывает; аутолиз клетки, неизбежный
при некрозе. Ведущую роль в деструкции
лизосом играет так называемый эндогенный
детергентный эффект.

Еще основатель учения о некробиозе
Д.С.Насонов отмечал, что при начальных
степенях повреждения клеток краситель
нейтральрот локализуется в них компактно,
в виде гранул, а при глубоком повреждении
– распределяется по цитоплазме диффузно.
В последующем было выяснено, что
нейтральрот, как и многие слабые
основания, избирательно накапливается
в лизосомах в связи с кислой реакцией
их содержимого, создавая впечатление
«гранул». Диффузное его распределение
соответствует этапу нарушения целостности
лизосом. Многие слабоосновные соединения
избирательно накапливаются в лизосомах
благодаря сходному феномену, названному
«эффектом протонной ловушки». Часть
из них ингибирует лизосомальные ферменты.
С этим связан противовоспалительный и
противомалярийный эффект хлорохина и
противоязвенное действие коррагинана.

Стабилизатором лизосомальных мембран
служит антибиотик фосфамицин, в связи
с чем он даже применяется для купирования
нефротоксического действия других
антибиотиков. Некоторые лизосомотропные
соединения дестабилизируют мембраны
этих органелл и являются настоящими
лизосомомембранотоксинами. Их действие
вызывает аутолиз и некроз клеток.
Выработкой подобных токсинов отличаются
некоторые грибки.

Желтый аспергилл производит так
называемые афлотоксины, соединения
фурокумариновой природы. Отравление
афлотоксином приводит к массивному
некрозу печени и острой печеночной
недостаточности. Механизм действия
афлотоксина связан с резкой дестабилизацией
этим ядом лизосомальных мембран в
клетках печени и аутолизом гепатоцитов.
Помимо этого, он нарушает транскрипцию
и является гепатоканцерогеном. Грибок
семейства фузариум выделяет токсин
спорофузарин. Этот лизосомальный яд
вызывает некроз клеток миндалин,
сопровождаемый их отеком и воспалением
(септическая ангина), а, попадая внутрь,
провоцирует некротические изменения
в костном мозге, приводящие к панцитопении
апластического характера в периферической
крови. Спорофузариновая интоксикация
известна под названием«алиментарной
токсической анемии». Афлотоксикоз и
алиментарная токсическая алейкия
связаны с употреблением в пищу зараженного
вышеназванными плесенями зерна.

Еще одна образная характеристика лизосом
принадлежит Котрану и Кумару, назвавшими
эти органеллы «мусорными корзинами
клетки». Неперевариваемые остатки
липидных мембран объектов ауто- и
гетерофагии сохраняются и подвергаются
перекисному окислению во вторичных
лизосомах, давая коричнево-желтый
стабильный пигмент липофусцин, накопление
которого ассоциируется с процессами
атрофии или отдаленными последствиями
обратимого повреждения клеток. Этот
пигмент накапливается с возрастом и
маркирует процессы старения.

Помимо липофусцина, в лизосомах фагоцитов
могут сохраняться (и довольно долго)
различные неметаболизируемые частицы.
Описаны случаи, когда в фагоцитах мокроты
у бывших шахтеров, тридцать и более лет
не спускавшихся под землю, продолжали
обнаруживаться частицы угля. Так как
срок жизни фагоцитов невелик, этот
феномен свидетельствует о том, что
объекты фагоцитоза персистируют внутри
фагоцитов, передаваясь от одного их
поколения другому путем фагоцитоза
собственных стареющих или погибающих
клеток.

Персистирование объектов фагоцитоза
внутри вторичных лизосом возможно и
для многих микроорганизмов. Такие
микробы обладают веществами (например,
лектинами), блокирующими слияние лизосом
с фагосомами, или ингибиторами завершающей
фазы фагоцитоза. Примером может служить
возбудитель коклюша бордетелла. Инфекции,
вызванные такими возбудителями, могут,
подобно коклюшу, иметь затяжное течение
или дают поздние рецидивы. Так, описаны
рецидивы сыпного тифа через 50 и
более лет после заболевания, в форме
так называемойболезни Брилля,
вызываемые активизацией риккетсий,
персистировавших в макрофагах. Авторы
наблюдали случай болезни Брилля у
пожилого пациента, который юношей
красноармейцем перенес сыпной тиф,
сражаясь в Первой конной армии. Через
пятьдесят лет с лишним повторились не
только основные соматические симптомы
болезни – даже содержание бредовых
видений возвращало комсомольца двадцатых
годов в эпоху Гражданской войны

Многие неорганические объекты фагоцитоза
могут представлять для клетки бомбу
замедленного действия, так как, попадая
в лизосомы, не перевариваются, но могут
сами разрушать эти органоиды изнутри.
Таковы, например, двуокиси кремния и
титана, алмазная пыль. Разрушая
альвеолярные макрофаги, эти агенты
способны запустить в легких хроническое
воспаление с исходом в фиброз, что
наблюдается при силикозе и близких к
нему профессиональных заболеваниях.

Длительное персистирование антигенов
внутри макрофагов, лизосомы которых не
завершили фагоцитоз, создает условия
для развития гиперергических реакций
замедленного типа и формирования
гранулем. Поэтому многие подобные
инфекции (туберкулез, бруцеллез, сифилис)
сопровождаются гранулематозным
воспалением. Показано, что лизосомальные
антигены могут быть объектом образования
аутоантител, способствующих цитолизу.
При некоторых наследственных энзимопатиях
лизосомы не способны переварить те или
иные субстраты (гликозаминогликаны,
липиды или их комплексы, гликоген и
др.). Подобные болезни характеризуются
как тезаурисмозы или «болезни накопления»,
поскольку непереваренные субстраты
образуют в лизосомах стойкие включения.

К лизосомальным болезням относятся
болезни накопления липидов и гликолипидов
(например, наследственные ганглиозидозы
– болезнь Тея-Сакса и болезнь Зандхоффа,
наследственный галактоцереброзидоз –
болезнь Краббе, наследственный
сфинголипидоз – болезнь Ниманна-Пика),
мукополисахаридозы (например, болезни
Сан-Филиппо А, В, С иD–
гепарансульфатозы, болезнь Моркио –
кератансульфатоз, болезнь Марото-Лами
– дерматансульфатоз), гликогеноз 2 типа
(болезнь Помпе или дефицит кислой
мальтазы).

Клинические симптомы, как правило,
касаются, главным образом, тех тканей,
где в норме должен идти наиболее
интенсивный лизосомальный гидролиз
того или иного субстрата. Общей чертой
таких заболеваний нередко является
нарушение психомоторного развития и
иммунитета, потому что среди загруженных
субстратами клеток оказываются нейроны
и макрофаги. Поражение ЦНС наиболее
характерно для липидозов и
глико(муко)липидозов, так как компоненты
миелина и клеточных рецепторов –
цереброзиды, сфинголипиды и их комплексы
с углеводами наиболее широко представлены
в нервной ткани. В то же время, гликогеноз
Помпе протекает без задержки психического
развития, за то поражаются клетки,
образующие гликоген, и имеет место
миокардиодистрофия, миопатия и нарушение
функций печени.

Цитологи до сих пор дискутируют, являются
ли пероксисомы разновидностью лизосом
или же самостоятельными древними
домитохондриальными окислительными
органеллами. Пероксисомы выполняют в
клетке ряд важных функций, включая
образование и инактивацию перекиси
водорода, окисление жирных кислот до
ацетилкоэнзима А, окисление мочевой
кислоты. Наследственный дефект, связанный
с отсутствием пероксисом, абсолютно
смертелен и приводит к гибели новорожденных
через несколько месяцев при явлениях
иммунодефицита и гипоксии. Пероксисомы
обеспечивают кислородзависимый
бактерицидный эффект при фагоцитозе.
Во время повреждения клетки альтерация
пероксисом способствует процессам
образования свободных радикалов.
Нарушение утилизации жирных кислот
позволяет этим субстратам формировать
в цитоплазме детергенты, что способствует
омылению клетки и разрушению ее мембран.

При массовом разрушении клеток и их
ядер, например, при синдроме длительного
раздавливания, из пуриновых оснований
в организме образуется значительное
количество мочевой кислоты. Интенсивная
работа уратоксидазы в пероксисомах
приводит к освобождению значительного
количества активных кислородных
радикалов, что способствует вторичному
повреждению клеток. Применение в этих
условиях блокаторов образования мочевой
кислоты, например, аллопуринола, облегчает
течение травматического синдрома.

Соседние файлы в папке Патофизиология 2

#
#
15.04.20151.55 Mб45~WRL0001.tmp
#
#
#
#
#
#
#
#
#

Источник